Схема № 2 – Разведение антибиотика

Схема № 3 Приготовление взвеси микроорганизмов

Культура в разведении 10 ⁵ готовим 1 млрд = 10⁹ м.к./мл

0,1мл + 9,9 ф.р. = 10⁷

0,1 мл + 9,9 ф.р. = 10⁵

Постановка опыта.

В 12 стерильных пробирок разливают по 1 мл разведения антибиотиков. В 1-ую пробирку вносят 1 мл разведения антибиотика в 256 ЕД/мл, во 2-ую пробирку 1 мл антибиотика в 128 ЕД/мл. в 3-ую пробирку 64 ЕД/мл, в 4-ую – 32 ЕД/мл, в 5-ую – 16 ЕД/мл, в 6-ую – 8ЕД/мл, в 7-ую – 4 ЕД/мл. в 8-ую – 2 ЕД/мл, в 9-ую – 1 ЕД/мл, в 10-ую – 0,5 ЕД/мл. Содержимое 11-ой пробирки служит контролем роста бактерий (КК), а 12-ой контролем стерильности среды (КС). Во все пробирки, кроме 12-й, вносят 0,2 мл испытуемой культуры (10⁵) (схема № 4). Посев инкубируют в термостате в течение 18-24ч и регистрируют результаты опыта.

УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТА. Учет результата проводят при наличии роста в КК и отсутствии роста в КС. Затем отмечают последнюю пробирку с полной видимой задержкой роста микробов. Количество антибиотика в этой пробирке является минимальной ингибирующей концентрацией (МИК) для исследуемого штамма и определяет степень его чувствительности к данному антибиотику.

Схема № 4 Определение чувствительности бактерий к антибиотикам

10⁵

По 02 мл

37⁰С 18-24 ч К₁ – контроль культуры

К₂ – контроль бульона

УЧЕТ:МИК препарата определяют по последней пробирке с отсутствием роста

IV. Выходной контроль.Тестовый опрос.

Методические рекомендации студентам к практическому занятию

по теме: «Определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам методом «серийных разведений»»